水質(zhì)大腸菌群酶底物法檢測系統(tǒng)介紹

一、 檢測用途：

   酶底物法測定用途：用于檢測水中總大腸菌群糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）和大腸埃希氏菌。可用于檢測水的類型：飲用水、水源水、廢水、食品水、地表水、地下水、海水、瓶裝水、中水、二次供水、管網(wǎng)水、畜牧用水、醫(yī)療用水等。

二、檢測原理：

酶底物法采用 ONPG 和 MUG 兩種營養(yǎng)指示劑，這兩種試劑分別可以被大腸菌群的 β-半乳糖苷酶和大腸桿菌的 β-葡糖醛酸酶分解代謝。當(dāng)大腸菌群在酶底物檢測試劑中生長時(shí)，其使用 β-半乳糖苷酶分解代謝 ONPG，并使樣品從無色變?yōu)辄S色。大腸桿菌使用 β-葡糖醛酸酶分解代謝 MUG 時(shí)，能夠發(fā)出熒光。

三、 優(yōu)勢特點(diǎn)：

酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸桿菌檢測標(biāo)準(zhǔn)方法，酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測的*先進(jìn)方法，目前以其方便快捷，假陽性低，適用大量樣品快速檢測等優(yōu)點(diǎn)正逐步被國內(nèi)檢測部門所認(rèn)可。

相對于多管發(fā)酵和濾膜法，酶底物法檢測步驟大大減少，而且對實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求不高，檢測時(shí)間可減少到24小時(shí)，在日常水樣監(jiān)測及應(yīng)急監(jiān)測中具有很好的應(yīng)用前景，可及時(shí)檢測，預(yù)防，*大限度的減少重大公共**事故的發(fā)生幾率。 以GB5750-2006中總大腸菌群測定為例，比較三種方法，如表所示。

表1 多管發(fā)酵法、濾膜法及酶底物法比較統(tǒng)計(jì)

方法優(yōu)勢：

1.無需在無菌室內(nèi)操作。

2.手工操作時(shí)間小于1分鐘。

3.無需培養(yǎng)基制備和大量玻璃器皿**。

4.24小時(shí)即可完成定性定量分析，無需驗(yàn)證試驗(yàn)。

已經(jīng)列入

1.GB/T5750.12-2006《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》微生物指標(biāo)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.colitech酶底物法檢測試劑，LK定量檢測盤/定量孔板，LK定量瓶出廠前均已**，客戶可以直接放心使用。

2.colitech酶底物法檢測試劑是我公司潛心研制并符合GB/T5750.12-2006的酶底物法培養(yǎng)基，假陽性和假陰性均優(yōu)于傳統(tǒng)方法。

3.colitech酶底物法檢測試劑經(jīng)大量客戶實(shí)驗(yàn)室使用和驗(yàn)證，表明與傳統(tǒng)方法多管發(fā)酵法和濾膜法具有方法一致性和可比性。

準(zhǔn)確/可信

● 使用MPN法進(jìn)行定量檢測，可直接檢測100毫升水樣中1～2419MPN(個(gè))目標(biāo)**

● **檢出100ml水樣中單個(gè)的活性大腸桿菌群和大腸埃希氏菌,假陰性低

● 每個(gè)單位試劑可抑制上百萬個(gè)異養(yǎng)**，假陽性低

● 無需驗(yàn)證試驗(yàn)，準(zhǔn)確性高于濾膜法及多管發(fā)酵法

● 符合中國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5750.12－2006《生活飲用水檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)》

簡單/快捷

● 檢測時(shí)間不超過24小時(shí)，無需確證試驗(yàn)

● 簡單培訓(xùn)就能輕松使用，手工操作少于一分鐘

● 不會(huì)因?yàn)檫^濾阻塞(濾膜法)或異養(yǎng)細(xì)胞的干擾(多管發(fā)酵法)而產(chǎn)生數(shù)據(jù)誤差

● 無需玻璃器皿清洗及菌落計(jì)數(shù)，減輕實(shí)驗(yàn)人員工作量

● 適用于大量樣品的批量快速檢測

四、 配件以及技術(shù)方案：

   針對酶底物法檢測的原理采購相應(yīng)的設(shè)備。用途如下：

程控定量封口機(jī)：用于定量檢測盤的封口。

酶底物檢測試劑：用于選擇性檢測水中的目標(biāo)**。

51或97定量檢測盤：用于判斷目標(biāo)微生物數(shù)量。

100毫升定量瓶/取樣瓶：專業(yè)的為水樣與試劑提供溶解環(huán)境。

紫外手持式紫外分析儀帶暗室：測定大腸埃希氏菌時(shí)用于在暗室中觀察熒光。

五、 操作方法：

**步：將水樣加入100ml取樣瓶中，加入酶底物法檢測試劑，擰緊蓋子搖勻至完全溶解。

**步：將樣品加到定量檢測盤中。

第三步：使用程控定量封口機(jī)對定量檢測盤進(jìn)行樣品分配及封口

第四步：將封口好的定量檢測盤放在36±1℃，如需測定糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）則將培養(yǎng)箱設(shè)定為44.5℃，培養(yǎng)24h.

第五步：對照比色盤數(shù)陽性（顯黃色，或熒光）格子數(shù)，按照使用的檢測盤類型，分別查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大腸菌群的菌群數(shù)。對照MPN表出數(shù)據(jù)。

第六步：根據(jù)稀釋倍數(shù)*終結(jié)果按公式計(jì)算結(jié)果

大腸菌群(個(gè)/L)=MPN值×稀釋倍數(shù)×1000mL/100mL